戴安液相色譜柱需要注意的地方 戴安液相色譜柱的使用和維護(hù)十分重要，液相色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響柱子的壽命，稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
戴安液相色譜柱的正確使用：(1)柱子在裝卸、更換時(shí)，動(dòng)作要輕，接頭擰緊要適度，必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng)，以免柱床產(chǎn)生空隙。(2)如果儀器用來(lái)做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常 規(guī)分析配置一根柱，這樣有助于延長(zhǎng)柱子的壽命。(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)，溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況，柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因 此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩。
戴安液相色譜柱應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳唬缡褂弥鶞乜刂蒲b置時(shí)，應(yīng)注意在通人流動(dòng)相后才能升溫，一般說(shuō)來(lái)戴安液相色譜柱不能反沖，只有生 產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效，選擇使用適宜的流動(dòng)相，以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使 流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換，經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗戴 安液相色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí)，對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL，保存戴安液相色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充 滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置或更長(zhǎng)時(shí)間。
戴安液相色譜柱使用過(guò)程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi)，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷， 死體積增大，在完成分離分析工作之后，不應(yīng)立即停機(jī)，需及時(shí)對(duì)色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，一般0.5h以上，以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
由于懸浮在樣品或流動(dòng)相中的細(xì)小顆粒會(huì)堵塞戴安液相色譜柱兩端的篩板，因此在進(jìn)行色譜分離前，應(yīng)保證樣品和所用的流動(dòng)相具有較高的潔凈度。樣品在進(jìn)樣前應(yīng)對(duì)其進(jìn)行簡(jiǎn)單的針筒過(guò)濾；流動(dòng)相的純度至少應(yīng)該 達(dá)到分析純，推薦使用色譜純的試劑。在對(duì)樣品進(jìn)行分離前必須對(duì)流動(dòng)相樣品的pH值進(jìn)行測(cè)試，確保流動(dòng)相的pH值應(yīng)在色譜柱允許范圍內(nèi)，不至于造成基質(zhì)的流失和塌陷。當(dāng)必須要在pH值適用范圍的邊界（特別是pH值 在8.0~10.0時(shí)）條件下使用液相色譜柱時(shí)，每次使用結(jié)束后應(yīng)立即用適合于戴安液相色譜柱保存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑淋洗，并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。
